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我司已于2月10日正式复工,恢复正常下单、发货、技术咨询等工作!    【新品】不拖尾的安全核酸染料        新品推荐(第二件半价):无需固定破膜的活细胞周期试剂盒

  • YF®488-Annexin V and PI Apoptosis Kit

    产品货号: Y6002

    产品规格: 50T/100T

    目录价(元):1200/1800

    可替代的同类产品:AF488-Annexin V & PI, FITC-Annexin V & PI


产品概述:

产品内容

组分

50T

100T

A. 1×Annexin V 结合缓冲液

50 mL

50 mL×2

B. YF488-Annexin V

250 μL

500 μL

C. PI

500 μL

1 mL


储存条件
4℃避光冷藏,请勿冻存。本产品在推荐条件下可以储存 6 个月。 

光谱特性 
YF488-Annexin V: Abs/Em =490/515 nm
PI: Abs/Em = 535/617 nm (with DNA)

产品介绍 
YF488-Annexin V  PI 凋亡试剂盒提供了一种快速简便的方法,通过标记早期凋亡细胞(绿色)和坏死细胞(红色),用于检测细胞凋亡水平。产品可以使用流式细胞仪或其它荧光检测设备进行检测。
YF488-Annexin V可以标记凋亡细胞。Annexin V 选择性结合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine,简称 PS)。在细胞发生早期凋亡时,PS 会外翻到细胞表面,即细胞膜外侧。用绿色荧光探针YF488 标记的 Annexin V,即 YF488 -Annexin V,可以结合外翻的磷酯酰丝氨酸,从而检测细胞凋亡的重要特征。我们公司的 YF488 染料与荧光素/FITC 相比,荧光亮度更高,且不受环境中 pH 的影响,具有良好的光稳定性。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种 DNA 结合染料,它可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞的细胞核。PI 可以由 488,532  546 nm 的激光激发,呈现红色荧光。

说明书:


    UE-Y6002

常见问题解答:


为何染色结果显示细胞凋亡率过高?
1.凋亡时间处理过长,使细胞全部死亡。建议重新摸索细胞凋亡条件,使细胞处于不同的凋亡状态。
2.假阳性染色。对于贴壁细胞,胰蛋白酶消化时间过长或机械刮擦细胞会暂时破坏质膜,使Annexin V能够与磷脂酰丝氨酸结合。建议在胰蛋白酶消化或机械刮擦细胞后,使细胞在最佳细胞培养条件和培养基中培养约30分钟,以恢复其膜完整性。

实验结果使用什么仪器观察?
实验结果可以通过流式细胞仪和荧光显微镜进行观察,但更推荐使用流式细胞仪。因为正常的细胞和凋亡的细胞膜上都有磷脂酰丝氨酸(PS),只是凋亡细胞膜外更多,可以结合更多的Annexin V,流式细胞仪更灵敏,可以区分出微小差异,将正常细胞与凋亡细胞分成不同的两群,但如果用荧光显微镜,可能观察不到这一差别,尤其是贴壁细胞。若要在成像测定中检测细胞凋亡,推荐使用SuperView™ 488 Caspase-3 Assay Kit for Live Cells(S6007)

流式细胞仪检测细胞凋亡,结果图中的各个象限代表什么状态的细胞?
左上角:Annexin V-/PI+,坏死细胞,也可能包含少数的晚期凋亡细胞或机械损伤的细胞;右上角: AnnexinV+/PI+,晚期凋亡细胞;右下角:AnnexinV+/PI-,早期凋亡细胞;左下角:AnnexinV-/PI-,正常细胞。

这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗?
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸,包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA,由于RNA的干扰,用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时,凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 若果需要进行细胞周期检测,推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit(C6031)

引用及参考文献:


1.Iron Accumulation Leads to Bone Loss by Inducing Mesenchymal Stem Cell Apoptosis Through the Activation of Caspase3
Ye YuanFei XuYan CaoLi XuChen YuFan YangPeng ZhangLiang WangGuangsi ShenJianrong WangYoujia Xu
Biological Trace Element Research(2018) 434–441

2.
铁蓄积诱导间充质干细胞凋亡并抑制成骨活性的研究
袁晔, 张鹏王亮, 徐非, 俞晨, 杨帆, 张辉, 易剑桥, 徐又佳
中华实验外科杂志 (2017) 1839-1842 

3.Near-infrared upconversion–activated CRISPR-Cas9 system: A remote-controlled gene editing platform
Yongchun Pan, Jingjing Yang, Xiaowei Luan, Xinli Liu, Xueqing Li, Jian Yang, Ting Huang, Lu Sun, Yuzhen Wang.
Science Advances(2019)

4.外泌体介导乳腺癌 MCF-7 细胞对多柔比星耐药性的机制
张如月; 李朵璐; 杨哲; 郭金秀; 周玉冰
药学学报(2019)

5.MS-275联合顺铂对食管鳞状细胞癌9706细胞氧化损伤和凋亡的影响
刘腾飞,王亚苹,李亚,张振坤,李喆,周馨魁,张璐玉,王文杰,刘红涛,张彦婷,关方霞,马珊珊
郑州大学生命科学学院

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