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无缝克隆

发布时间:2019/7/2 点击次数:645 来源:US Everbright Inc.

轻松简捷的科研——UE 无缝克隆试剂盒

Minerva Super Fusion Cloning Kit(M2026)


货号
产品名称
规格
M2026-20T
(无缝克隆试剂盒)
20T
M2026-50T
50T

产品特点

l  一管式Mix,简单快速高效,反应最快仅需5min

l   可高效克隆50 bp-10 kb DNA片段,阳性率可达95%以上;

兼容单片段、多片段连接


无缝克隆实验步骤:


克隆构建的方法比较

克隆方式
片段要求
载体要求
是否定向
连接序列数(载体+片段)
TA克隆
带3’-A末端
专用T载体

2
平端克隆
平末端
专用平端克隆

2
酶切-连接
两端为酶切位点,且片段内不含对应酶切位点
含相应酶切位点

2
无缝克隆
任意片段
任意载体

≥2


多片段重组克隆应用案例:

使用UE Minerva Super Fusion Cloning Kit,依靠其独特的非连接酶依赖体系,无载体自连,进行了3个片段的重组实验,克隆阳性率高达95%以上。重组产物转化平板后,挑取菌落进行菌落PCR鉴定,插入片段阳性率检测如下图所示,菌落PCR后取阳性菌提质粒测序,测序鉴定结果表明,三个目的片段全部重组进入质粒载体中,并且重组位点未发生碱基错配、丢失等现象。


平板
菌落个数
菌落PCR反应个数
菌落PCR阳性个数
阳性率
转化平板
9520
24
23
96%


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